Soft-Agar-Ersatz

Ich habe Petrischalen mit einer Basis-Agarschicht für die E. coli - Kultivierung bereit. Ich habe jedoch keinen Weichagar, in dem ich die E. coli verdünnen könnte, bevor ich sie auf die Platte gieße.

Irgendwelche Vorschläge, welche Substanz ich verwenden kann, um Soft-Agar zu ersetzen, oder wie ich es herstellen könnte? Folgendes steht mir aus dem Labor der Schule zur Verfügung:

  • Trypton-Base-Agar
  • Nährbrühe
  • MacConkey-Agar

Das ursprüngliche Weichagarmedium hatte die folgende Zusammensetzung:

  • 10 g Bacto™ Trypton
  • 9 g Bacto™-Agar
  • 5 g KCl
  • 1000 ml Wasser
Sie wollen die Zellen in einem Medium mit Agar aufnehmen und anschließend ausplattieren?
@Chris Ja! Ich habe ursprünglich eine Weichagarlösung verwendet, die aus 10 g Bacto™ Trypton, 9 g Bacto™ Agar, 5 g KCl, 1000 ml Wasser bestand.
Und ich vermute, dass Ihre Standardplatten mit Ihrem Medium + Agar hergestellt werden?
@ Chris Richtig, das E. coli im Medium wird über den Basisagar gegossen, sodass die Standardplatten das Medium und den Agar enthalten.
Ah, ich bereite die Platten mit Medium + Agar vor.

Antworten (1)

Die gute Nachricht ist: Sie brauchen kein Agar in Ihren Plattenmedien, da die Bakterien sowieso auf der Oberfläche wachsen und die Platte etwas zusätzliche Feuchtigkeit von Ihren Plattenmedien aufnehmen kann.

Was ich normalerweise mache, ist, die Teller eine Weile zu trocknen (und sie auch aufwärmen zu lassen, da sie im Kühlschrank aufbewahrt werden), mit dem Teller nach unten und etwas geöffnet. Verschmutzungen sind hier in der Regel kein Problem.

Dann verdünne ich die Zellen in einem geeigneten Volumen Medium, plattiere dann etwa 50 bis 100 &mgr;l auf dem Agar und verteile es mit einem Drygalski-Spatel. Legen Sie die Platte in den Inkubator und alles ist in Ordnung.

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