Zweck der Verdünnungsausstriche oder Ausstrichreinigung

Beim Verdünnungsausstrich wird ein Tropfen Flüssigkultur mit einer Impföse gesammelt und dann über die Agarplattenoberfläche ausgestrichen. Am Ende des Ausstreichens klammert sich die Anzahl der Organismen an die Schleife, bis nur noch einzelne Zellen an einem bestimmten Ort abgelagert sind und Sie koloniebildende Einheiten erhalten.

Eine Agarplatte mit Ausstrichreinigung

Ich frage mich jetzt, was genau der Zweck dieser Streak-Reinigung ist. Wenn Sie Ihre Bakterien züchten möchten, warum geben Sie nicht einfach ein paar Tropfen der Flüssigkultur auf die Agarplatte? Warum ist es besonders nützlich, diese Technik zu verwenden? Oder warum sollten Sie diese Methode der „Spread Plate“-Technik vorziehen, bei der eine Flüssigkultur zuerst einer Reihe von Verdünnungen unterzogen wird und jede Verdünnung dann direkt auf die Oberfläche separater Agarplatten gegeben wird.

Antworten (1)

Der Zweck dieser Technik besteht darin, die Bakterienzellen so stark zu verdünnen, dass Sie einzelne Zellen erhalten, wie auf dem Bild der Platte zu sehen ist. Sie können dann die aus diesen einzelnen Zellen gewachsenen Kolonien auswählen, sie charakterisieren, sie auf Mutationen/Plasmide oder andere von Ihnen eingeführte Veränderungen testen und sicher sein, dass Sie nur die Nachkommen einer einzelnen Zelle in Ihrer Kultur haben.

Auf diese Weise stellen Sie sicher, dass Sie nicht eine Mischung aus verschiedenen Zellen mit unterschiedlichen Eigenschaften züchten, von denen eine die andere schließlich überwächst. Das Ausstreichen ist eine schnelle und zuverlässige Technik, die besonders gut funktioniert, wenn Sie eine größere Anzahl von Bakterienkulturen testen möchten. Es ermöglicht auch, eine Stammkultur sehr schnell auf Kontaminationen mit anderen Bakterien zu überprüfen, indem einfach die einzelnen Kolonien mit dem Auge untersucht werden (verschiedene Bakterien sehen oft anders aus).

Das Verdünnen der Kulturen würde auch funktionieren, muss jedoch in mehr als einem Schritt durchgeführt werden und ist mehr Arbeit, wenn Sie dies für mehr als eine Kultur tun möchten. Auch für Verdünnungen plattieren Sie oft mehr als eine Platte, um sicherzugehen, dass Sie eine Platte mit einzelnen Kolonien haben (wenn die Zellzahl unbekannt ist).

Vielleicht haben Sie das auch angedeutet, aber es ist eine schnelle Methode, um festzustellen, ob Ihr Bestand eine oder mehrere Sorten enthält (vorausgesetzt, Sie können sie mit dem Auge unterscheiden).
Und wenn Sie nicht wissen, wie viele Zellen Sie haben, würden Sie auch mehr als eine Platte verwenden, wenn Sie Verdünnungen ausplattieren.
@VonBeche Gute Punkte, ich habe sie hinzugefügt.
Tolle Antwort, ich liebte diese Technik, da es so schnell geht, schnell Einzelzellen/Monoklone zu erhalten. Man kann praktisch keine seriellen Verdünnungen durchführen, wenn man 10s von Kulturen oder Zelltypen durchlaufen muss.