Algenwachstum oder -sterben messen

Meine Tochter (10. Klasse) führt ein Wissenschaftsprojekt zur Toxizität von Triclosan für die Alge Selenastrum capricornutum durch. Sie fragt sich, wie sich der Effekt angesichts der begrenzten Ressourcen der Schule am besten messen lässt.

  • Sollte sie das UV/Vis-Spektrophotometer der Schule verwenden oder einfach nur eine Low-Tech-Zellzählung durchführen?
  • Wenn sie UV/Vis verwendet, muss sie dann eine Kalibrierungskurve erstellen, bei der sie die Zellen für eine bestimmte Anzahl von Datenpunkten manuell zählt?
  • Oder kann sie einfach die Absorption in % mit den Kontrollen und den Vorher/Nachher-Zahlen vergleichen?
  • Oder ist für diese spezielle Alge bei einer bestimmten Wellenlänge bereits bekannt, dass eine bestimmte %Absorption einer bestimmten Anzahl von Zellen entspricht?
  • Wenn sie UV/Vis verwendet, zeigt das die Gesamtzahl der Zellen an, tot oder lebendig, oder misst es nur lebende Zellen?

Die Testversion dauert über 96 Stunden. Vielen Dank!

Ich habe einige meiner Kollegen, die mit Algen arbeiten, gebeten, sich einzubringen ... hoffentlich taucht einer von ihnen auf :)

Antworten (1)

Ich halte es nicht für ratsam, für dieses Experiment ein Spektrophotometer zu verwenden, da es sich um eine Gesamtzählung handelt, dh es kann nicht sehr gut zwischen toten und lebenden Zellen unterscheiden, und daher sieht sie möglicherweise keinen deutlichen Unterschied zwischen behandelten und unbehandelten Zellen Algen. Wenn sie Zugang zu einem Hämozytometer und einem guten Mikroskop hat, kann sie die lebenden Zellen direkt zählen und die Zellen/ml mit einer einfachen Formel berechnen.

Dieses Papier hat einen schönen Überblick darüber, wie man Algen mit einem Hämozytometer zählt, und wenn ihre Algenart schwimmen kann, müsste sie die hier erwähnte Jodlösung verwenden:

http://weis.science.oregonstate.edu/files/weis/Protocols/Symbiodinium/Cell%20Counts.pdf

Ich hoffe das hilft!

Ich stimme deiner Antwort zu, aber sie hat mich zum Nachdenken gebracht. Sie könnten ein Spektrophotometer verwenden, wenn Sie identische Algenproben nehmen, mit unterschiedlichen Wirkstoffkonzentrationen behandeln und dann jeweils ein Aliquot in eine frische Kultur (mit einer ziemlich großen Verdünnung) inokulieren. Indem Sie die OD dieser Sekundärkulturen zu einem späteren Zeitpunkt ablesen, können Sie die endgültige OD damit in Beziehung setzen, wie viele lebende Zellen inokuliert wurden. Dies könnte leicht standardisiert werden, indem eine Kalibrierung mit unterschiedlichen Mengen, die von einer unbehandelten Kontrolle geimpft wurden, eingerichtet wird.