Kann man bei erwachsenen Säugetieren ein Gen gezielt im Spinalganglion ausschalten? [geschlossen]

Da das Spinalganglion so klein ist, wäre das einfacher als der ganze Körper?

Willkommen bei BiologySE - wissen Sie, wie man einen Gen-Knockout für den ganzen Körper macht? Oder vielleicht ein gewebespezifischer Knockout? Das sind vielleicht bessere Fragen, denn dann werden Sie verstehen, warum die Größe eines bestimmten Gewebes oder Organs wichtig ist, aber eher die Genexpression eines bestimmten Organs. Es gibt eine Reihe von Übersichtsartikeln zu Gen-Knockout-Techniken. Ich würde empfehlen, dass Sie einen davon lesen und dann eine spezifischere Frage stellen, die hilfreicher wäre.
Was ist das genaue Problem, das Sie lösen möchten?

Antworten (1)

Es erfordert zwei genetische Konstrukte, um einen bedingten KO-Organismus zu schaffen. Ein Elternteil mit einem Transgen, das eine DNA-Rekombinase (z. B. Cre) nach dem Promotor eines Gens exprimiert, das NUR in Ihrem interessierenden Gewebe exprimiert wird. Der andere Elternteil enthält ein modifiziertes interessierendes Gen, das in Gegenwart der DNA-Rekombinase entfernt werden soll, ist aber ansonsten voll funktionsfähig.

Daher hängt die Fähigkeit, einen Knockout auf ein bestimmtes Gewebe auszurichten, von der Identifizierung eines Gens ab, das nur in dem interessierenden Gewebe exprimiert wird.

Es ist tatsächlich einfacher, ein KO eines ganzen Tieres zu erzeugen, aber da Genprodukte zeitlich in der Entwicklung und in verschiedenen Geweben unterschiedliche Funktionen haben können, kann ein KO eines ganzen Tieres tödlich sein, während das Entfernen in einem bestimmten Gewebe dies möglicherweise nicht ist und die Untersuchung des KO ermöglicht Auswirkungen dieser Entfernung.

Wenn also Ihr interessierendes Gen tödlich wäre, wenn es aus dem ganzen Organismus entfernt wird, UND Sie ein Gen kennen, das nur im DRG exprimiert wird, hätten Sie einen Anreiz zu sehen, ob ein CKO-Tier hergestellt werden könnte.

Eine kurze Suche nach der Cre Lox-Technologie wird Tausende von Bildern und Artikeln hervorbringen. Hier ist eine und eine schöne Illustration:

Geben Sie hier die Bildbeschreibung ein

@Hamham nur eine Anmerkung zu dieser Technik ... diese Technik funktioniert gut, aber Sie können den Zeitpunkt des Knockouts steuern ... das heißt, wenn Sie einige Mäuse herstellen und dann die Expression des Cre-Enzyms im erwachsenen Tier induzieren möchten (wenn Sie ein induzierbares Cre-System haben) können Sie das tun; Wenn das Cre jedoch während der Entwicklung in Embryonen exprimiert wird, fehlt das Gen von Geburt an und kann einen anderen Phänotyp aufweisen als wenn der Gen-Knockout bei einem erwachsenen Tier induziert wird.
@VanceLAlbaugh Kann der Teil "wenn du ein paar Mäuse machen willst" auf "wenn du ein paar wilde Mäuse fängst" umgestellt werden? Aka, im Gegensatz zum obigen Bild kann ich einfach jede Maus ohne transgene Eltern verwenden und darin den Gen-Knockout induzieren ...? Danke!
@Hamham Nein, das wäre bei Wildmäusen nicht erfolgreich - Sie müssen Labormausstämme verwenden, für die DNA-Sequenzinformationen bekannt sind. Wie oben angegeben, besteht die Idee darin, einen Mausstamm, der loxP-Stellen aufweist, die das interessierende Gen flankieren, mit einem anderen Stamm zu züchten, der ein gewebe-/zellspezifisches Cre-Rekombinase-Enzym exprimiert. Es gibt andere Technologien für Knockout (wie CRISPR en.wikipedia.org/wiki/CRISPR ); aber auch hier geht es darum, mit der Zucht von Mäusen zu beginnen, nicht um ein Gen in einer erwachsenen Maus auszuschalten
Kann man bei erwachsenen Säugetieren ein Gen gezielt im Spinalganglion ausschalten? [geschlossen]
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