Wenn ich Informationen zur Identifizierung von Krankheitsgenen nachschlage, beziehen sich die Texte oft auf das Gen, das „zuerst geklont“ wurde. Was bedeutet „klonen“ in diesem Zusammenhang? Ist es einfach ein Synonym für Entdeckung?
Üblicherweise wird dies im Rahmen der Genanalyse und weiteren Charakterisierung verwendet. Was getan wird, ist, dass ein Stück fremder DNA (entweder durch Verdau genomischer DNA (z. B. von Mensch oder Maus) oder durch PCR-Amplifikation erzeugt) am Ende der DNA verdaut wird, um passende offene Enden mit einem bakteriellen Vektor zu haben.
Die interessierende DNA wird dann mit dem Vektor ligiert und kann dann in Bakterien repliziert und einfach in großen Ausbeuten isoliert werden. Dieses Plasmid kann dann weiter analysiert werden (durch Restriktionsanalyse, Sequenzierung etc.), das Gen oder sein Promotor manipuliert und mutiert werden, oder im Fall von Protein-codierenden Genen das Gen, das in den Zellen überexprimiert wird. All dies ist nützlich, um die Funktion unbekannter Gene zu analysieren. Siehe die Abbildung für eine schematische Übersicht (aus Campbell AP Biology Book, 8. Ausgabe, über diese Website):
Technisch gesehen bedeutet die Herstellung eines Klons, dass Sie aus einem Vorläufer mehrere genetisch identische Tochterzellen erzeugen.
Remi.b
AliceD
MattDMo
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