DAPI wird als Farbstoff für heterochromatische und euchromatische DNA-Regionen verwendet. Der Barr-Körper ist heterochromatisch.
In der Folie der somatischen Zellen einer normalen menschlichen weiblichen Wange gibt es offensichtlich keinen anderen klaren dunklen Fleck innerhalb des Kerns als den Barr-Körper gegen die innere Kernmembran. - - Ich habe ein altes Mikroskop verwendet, daher kann meine Beobachtung falsch sein, wie im Kommentar angegeben.
Wie können Sie aus der gegebenen Folie schließen, dass der Fleck wirklich inaktive Satellitenzellen enthält, die nicht genetisch verwendet werden?
Warum ist das aktive X-Chromosom bei derselben Färbemethode nicht sichtbar? (Es kann wahrscheinlich durch eine andere Färbemethode sichtbar gemacht werden.)
DAPI (4',6-Diamidino-2-phenylindol) bindet vorzugsweise AT-reiche DNA (obwohl es auch CG-reiche DNA bindet), was Chromosomen charakteristische Bandenmuster verleihen kann, wenn sie polytän oder in der Metaphase sind. In kondensierten Interphase-Chromosomen, wie den inaktiven X-Chromosomen weiblicher Säugetiere (Barr-Körper), lässt die relativ hohe Konzentration an dicht gepackter DNA das Chromosom als heller Fleck im Zellkern erscheinen. Wenn die DNA eines Chromosoms dekondensiert wird (wie der Rest der Chromosomen in der Interphase), erscheint sie als mehr oder weniger homogen gefärbte DNA im Zellkern.
Ein großartiges Bild ist hier (siehe unten), A ist die DAPI-Färbung, B ist ein Protein, das am Barr-Körper lokalisiert ist, C ist die RNA (Xist), die den Barr-Körper bindet.
Da das aktive X nicht kondensiert ist, erscheint es wie der Rest der Chromosomen und kann daher nicht in der Mischung von Autosomen identifiziert werden. Der Unterschied im DAPI-Aussehen hat nichts mit der Aktivität an sich zu tun, sondern vielmehr Unterschiede darin, wie dicht die Chromosomen gepackt sind.
Den ersten Teil deiner Frage verstehe ich allerdings nicht. Sie können einem Standbild nicht entnehmen, dass der Barr-Körper relativ inaktiv ist. Wenn Sie Experimente an lebenden Zellen durchführen, könnten Sie die RNA-Produktion (unter Verwendung eines markierten Nukleotids), die Immunfluoreszenz messen, um die Lokalisierung von z. B. RNA-Polymerase oder Reportergenen zu zeigen, die sich auf den inaktiven gegenüber den aktiven X-Chromosomen befinden. Wenn Sie Ihre Frage präzisieren, kann ich besser antworten.
KAM
Léo Léopold Hertz 준영