Ich versuche, einen Tumor zu dissoziieren, und die meisten Protokolle wie NCI/NIH empfehlen einen 10-fachen dreifachen Enzymverdauungsbestand, bestehend aus: Kollagenase Typ IV, DNase I Typ IV und Hyaluronidase Typ V in HBSS. Dies geht bis in die 90er Jahre zurück, und die Rezeptur variiert zwischen Papieren (Dispase, Papain, neutrale Protease, Elastasen usw.). Das sogenannte offizielle Rezept, mit dessen Verwendung ich beauftragt wurde, besteht aus den oben genannten, jedoch hauptsächlich von Sigma-Aldrich (C5138, D5025, H6254).
Ich kann jedoch nichts finden, was die wirklichen Unterschiede zwischen diesen Enzymtypen aussagt. Oder warum zum Beispiel Typ-IV-DNase besser funktioniert als Typ-II und so weiter. Ist das Rezept vielleicht einfach hängengeblieben?
Es ist Jahre her, dass ich mir einen Sigma-Katalog angesehen habe (bevor er zu Sigma-Aldrich wurde), aber soweit ich mich erinnere, sind diese Bezeichnungen willkürliche proprietäre Bezeichnungen, die von Sigma verwendet werden, um verschiedene Quellen zu unterscheiden – der entscheidende Punkt ist, dass Sigma im Allgemeinen nicht alle diese Produkte hergestellt hat selbst, sondern von Dritten erhalten.
Der andere zu beachtende Punkt ist, dass diese Enzympräparate im Allgemeinen unrein waren / sind, jedoch in unterschiedlichem Maße, sodass Sie anhand der Typenbezeichnungen ein bestimmtes Präparat, das funktionierte, nachbestellen und auch die tatsächliche Qualität angeben konnten, die Sie bei der Veröffentlichung verwendet haben dass andere Ihre Arbeit wiederholen könnten. Teurere Qualitäten würden zweifellos auch in der von Ihnen beschriebenen groben Anwendung funktionieren, aber sie wären Geldverschwendung.
Ich dachte, die Kataloge würden Ihnen früher einige Informationen geben (zumindest über Organismen/Gewebe), aber wie gesagt, es ist lange her (obwohl Sie vorsichtig mit Ihrem „Weg zurück in die 90er Jahre“ sein sollten, junger Mann).
MattDMo
CKM
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David