Wie wird harnstoffhaltiges Wachstumsmedium sicher sterilisiert?

Ich verwende harnstoffhaltiges Wachstumsmedium für Experimente mit Bakterien (1-2 l/Tag). Nach dem Experiment muss das Wachstumsmedium sterilisiert und entsorgt werden. Ich habe das bisher durch Autoklavieren gemacht, aber unser Techniker bemängelte den dabei entstehenden Ammoniakgeruch (Harnstoff zersetzt sich beim Erhitzen und setzt Ammoniak frei).

Ich bin mir ziemlich sicher, dass die Menge, die in die Luft freigesetzt wird, nicht gefährlich ist (ich habe den Autoklaven mehrmals geleert), insbesondere wenn Sie den ersten Luftstoß, der nach dem Öffnen austritt, nicht gezielt einatmen, aber ich halte es für nützlich nach Alternativen zu suchen. Ich bin mir auch nicht sicher, ob der Autoklav auf Dauer Schaden nimmt.

Hat jemand Erfahrung damit? Sehen Sie eine Möglichkeit, größere Mengen an Nährmedium ohne Erhitzen zuverlässig zu sterilisieren?

Sie können die Medien mit chemischen Methoden sterilisieren - ich habe für diesen Zweck Reiniger verwendet, die Chlordioxid entwickeln. Das stinkt, außerdem riecht man beim Entleeren der Gefäße immer etwas Chlordioxid.
Ist das Bakterium potenziell pathogen? Um welche Bakterien handelt es sich im Grunde?
Es ist Sporosarcina pasteurii , nicht pathogen und kein GVO. Ich habe gerade eine E-Mail an unseren Sicherheitsbeauftragten geschrieben, um zu fragen, ob eine Sterilisation unbedingt erforderlich ist, aber ich denke, ich muss es tun. Außerdem werde ich in Zukunft GMOs verwenden, und dann ist es ein Muss.
Bazillen können Sporen bilden; Ich bin mir nicht sicher, ob dieser das kann. Manchmal verwende ich konzentrierte Säure (H₂SO₄), um Dinge zu desinfizieren, insbesondere Kolben, die lange ungewaschen waren (mit noch darin befindlichen Medien; sie enthalten eine Vielzahl von Organismen). Sie können die Säure nach der Behandlung neutralisieren. Es ist allerdings ein wenig gefährlich. Übliche Desinfektionsmittel sollten für Sie funktionieren.

Antworten (2)

Autoklavieren ist die beste Art der Sterilisation. Wenn Ihr Wachstumsmedium groß ist, wie viel chemisches Desinfektionsmittel müssten Sie Ihrer Meinung nach auf seine Arbeitskonzentration bringen?

Fügen Sie Ihrem Abfallmedium etwas Säure hinzu (so dass es nur noch schwach sauer ist), nicht als Desinfektionsmittel, sondern um die Ammoniakbildung zu unterdrücken. Harnstoff wird während des Autoklavierens immer noch abgebaut, aber Ammoniumionen (pKa ~ 9) bleiben im Allgemeinen in Lösung.

Sie sollten die Richtlinien Ihrer Institution überprüfen, da verschiedene Einrichtungen unterschiedliche Vorschriften haben, aber im Allgemeinen ist es akzeptabel:

In einem Abzug und in einem belüfteten (unversiegelten) Behälter:

1. Fügen Sie flüssiges Bleichmittel bis zu einer Endkonzentration von 20 % hinzu (fügen Sie 1 Teil Bleichmittel zu 3 Teilen Kultur hinzu)

2. Über Nacht sitzen lassen

3. Mit reichlich Wasser in den Abfluss entsorgen