Protein kann die Zellmembran nicht passieren, weil es ein großes Molekül ist. Gibt es bis jetzt eine Technik, die Protein in vivo durch die Zellmembran passieren lässt ? Ich möchte ein Protein-Medikament schaffen, das zugängliche DNA sein muss, um seinen Reaktionsort zu erreichen. Wie möglich kann ich es tun?
Es stehen verschiedene Proteintransfektionsverfahren zur Verfügung.
Die einfachste ist die Elektroporation. Durch die Verwendung elektrischer Impulse können vorübergehende Poren gebildet werden, sodass Proteine von außen in das Innere der Membran gelangen können.
Mehrere Proteintransfektionsreagenzien sind im Handel erhältlich. Ich denke, der Mechanismus ähnelt der Lipofektion von DNA.
http://www.clontech.com/US/Products/Transfection_and_Cell_Culture/Protein_Transfection/Protein_Transfection_Reagent https://www.neb.com/products/m2563-transpass-p-protein-transfection-reagent https://www.thermofisher. com/order/catalog/product/89850
Fusion mit der Transduktionsdomäne des transaktivierenden Transkriptionsfaktor-(TAT)-Proteins aus dem HIV-TAT-Protein. Diese Sequenz aus 11 Aminosäuren hilft Proteinen, die Plasmamembran zu durchqueren.
http://www.nature.com/mt/journal/v8/n1/full/mt2003155a.html
Ich füge hier ein paar Methoden hinzu.
Liposomen
Liposomen wurden entwickelt, um Medikamente an Orte zu bringen, an denen die Wirkung erwünscht ist. Medikamente sind in Liposomenvesikeln eingeschlossen, aber wenn sie die Plasmamembran erreichen, könnten Liposomen mit der Plasmamembran fusionieren und Medikamente innerhalb von Liposomen freisetzen, obwohl nicht alle Liposomen dafür ausgelegt sind, Zellmembranen zu fusionieren. Die Lipofektion von DNA unterscheidet sich etwas von dieser Art von Liposomen, da DNA nicht unbedingt in Vesikel eingeschlossen ist.
Nanopartikel
Das ist relativ neu. Ich habe nicht viel Wissen über Nanopartikel, aber ich weiß, dass sie verwendet werden, um DNA oder RNA in vitro und in vivo zu transfizieren. Ich weiß nicht, wie beliebt Nanopartikel für die Proteintransfektion sind, aber es gibt Veröffentlichungen.
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