Warum können wir von Mäusen produzierte Antikörper auf Mäusegewebe verwenden?

Der Grund, warum der sekundäre Antikörper nur den primären Antikörper erkennt, ist relativ einfach: Er richtet sich gegen den Fc-Teil des primären Antikörpers. Da dieser Teil artspezifisch ist (aber konstant zwischen allen Antikörpern einer Spezies, daher der Name konstant), richtet sich ein sekundärer Anti-Maus-Antikörper gegen alle Maus-Antikörper.

Das allgemeine Prinzip ist in der Abbildung zu sehen (obwohl dies von der Immunmarkierung stammt, bleibt das Prinzip gleich, Bild aus der Wikipedia ):

Der Anti-Maus-Sekundär erkennt die im Gewebe vorhandenen Antikörper. Diese sind normalerweise in geringen Mengen vorhanden (es sei denn, Sie arbeiten mit Immungeweben wie Milzen) und verursachen nur einen relativ geringen Hintergrund. Wenn dies ein Problem verursacht, können Sie Ihre Probe vor der Zugabe des Primärantikörpers mit einem Fc-Block behandeln, der die im Gewebe vorhandenen Antikörper blockiert, sodass der Sekundärantikörper später nicht mehr erkannt wird.

Antikörper sind sehr spezifisch in Bezug auf das, was sie erkennen (dies wird als Epitop bezeichnet, das ist der kleine Teil des Antigens, der von einem bestimmten Antikörper erkannt wird), und sekundäre Antikörper werden dazu gebracht, sich an einen bestimmten Teil des primären Antikörpers zu binden – das können Sie erreichen mit monoklonalen AB. Antigene können von vielen Antikörpern erkannt werden (weil sie viele Epitope für verschiedene Antikörper haben können), aber normalerweise erkennt ein einzelner Antikörper nur wenige oder wahrscheinlicher maximal ein einzelnes Antigen (da das spezifische Epitop, an das er bindet, nur auf wenigen vorhanden ist oder ein einzelnes Antigen(e)).

Die Wiki -Seite für Antikörper enthält viele Details zur Funktionsweise von ABs.