Warum verursacht eine hohe EDTA-Konzentration ein Anschwellen der Blutplättchen?

Wie es in einem alten Artikel von JG White aus dem Jahr 1968 berichtet wird :

Die Chelatisierung von Membrancalcium durch EDTA scheint deutliche Unregelmäßigkeiten in der Blutplättchenwand und ein massives Anschwellen des kanalikulären Systems zu verursachen. Das Anschwellen der inneren Kanäle ist die vorherrschende Veränderung bei EDTA-Blutplättchen, und diese Veränderung scheint letztendlich mit dem Abbau der Blutplättchen-Körnchen zusammenzuhängen.

Viele Artikel folgten dem oben berichteten, aber es scheint, dass die Hauptursache für das Anschwellen der Blutplättchen in Gegenwart von EDTA die Verringerung des Kalziumspiegels ist, die eine Art Blutplättchenaktivierung verursacht.

Diese Aktivierung könnte auch mit direkter EDTA-Wirkung in Verbindung gebracht werden, wie in diesem Artikel von Golański et al. :

Der Einfluss von EDTA auf die Dynamik der Blutplättchenmembran ahmte die Veränderungen, die durch die Wechselwirkung von Fibrinogen mit Blutplättchen-GPIIb-IIIa induziert wurden, genau nach. Somit könnte die EDTAK2-induzierte Thrombozytenaktivierung aus einer Störung der Thrombozytenmembranproteinstruktur und -konformation resultieren und möglicherweise mit einer „ unspezifischen “ Auslösung eines Signaltransduktionsweges zusammenhängen.

Wie auch immer, unter normalen Bedingungen scheint die Quantifizierung des Blutplättchenvolumens im Labor unter Verwendung von EDTA-Röhrchen nicht beeinflusst zu werden, wenn sie innerhalb von 1 Stunde seit der Entnahme durchgeführt wird (wie in diesem Artikel von Dastjerdi et al. berichtet ).

Ich denke, Ihre Frage stützt sich auf zwei völlig unterschiedliche Definitionen von "hohem" EDTA. Wirklich, beide Konzentrationen sind "hoch", aber eine von ihnen ist "wirklich, wirklich hoch".

Die einzigen Referenzen (z. B. hier oder hier ), die ich sehen kann und die etwas über die osmotischen Wirkungen von EDTA aussagen, beziehen sich auf die Entnahme von Blutproben, und insbesondere, wenn ein zu kleines Volumen in ein größeres Röhrchen gezogen wird, z. B. 0,5 ml Blut in einem 5 ml Röhrchen. In diesem Fall wird dem im Röhrchen befindlichen festen EDTA-Pulver eine Flüssigkeit (Blut) zugesetzt. Dies ist bereits eine hohe EDTA-Konzentration, die ausreicht, um das gesamte Kalzium in der Umgebung aufzuwischen, um eine Gerinnung zu verhindern.

Wenn Sie das Röhrchen jedoch nur zu 10 % füllen, ist 10-mal mehr EDTA-Pulvervorvolumen vorhanden als erforderlich, um eine Gerinnung zu verhindern. Das ist nicht nur hoch, es ist unglaublich hoch. EDTA ist in diesem Zusammenhang normalerweise ein Kaliumsalz, das können also bis zu ~ 100 mOsm sein, was definitiv osmotische Effekte verursachen würde, aber das liegt in der Größenordnung einer 10-fach höheren Konzentration als Ihre Referenz für Blutplättchen (was ich nicht kann Zugriff leider). Wenn Sie in Ihrer Frage angeben:

Ich weiß, dass eine hohe EDTA-Konzentration die Plasmaosmolarität erhöht, was zu einer Zellschrumpfung führt

... dies scheint die beste Erklärung zu sein, es sei denn, Sie können eine andere Referenz vorweisen, die eine erhebliche Zellschrumpfung bei niedrigeren Konzentrationen (~ 2 mg / ml) zeigt. Ich sage nicht, dass es auf diesem Niveau keinen osmotischen Effekt geben kann, nur dass es nur ein paar Prozent des Zellvolumens sein würde und bei nichts anderem als den besten Assays erkennbar wäre.

Auf der anderen Seite der Gleichung haben die Auswirkungen auf Blutplättchen dann nicht mit osmotischen Effekten zu tun, sondern auf eine etwas paradoxe Aktivierung von Blutplättchen, wie in @ DavideNs Antwort. Stellen Sie sich Blutplättchen als Zellen vor, die „vorbereitet“ sind, sich auszudehnen, wenn es nötig ist, um eine Blutung zu stoppen; In einigen Fällen scheint EDTA ein Auslöser für diesen Prozess zu sein, in anderen jedoch nicht (siehe auch hier die widersprüchlichen Referenzen von @ DavideN).

Verweise:

Goossens, W., DUPPEN, V., & Verwilghen, RL (1991). K2‐ oder K3‐EDTA: das Antikoagulans der Wahl in der routinemäßigen Hämatologie?. Internationale Zeitschrift für Laborhämatologie, 13(3), 291-295.