Was ist die erwartete Wirkung des pH-Werts auf die Aktivität einer Pilzpektinase?

Ich arbeite an einem Enzymassay für eine Pilzpektinase. Ich habe das Enzym in verschiedenen Puffern von pH 1 bis 12,5 getestet. Das Enzym hat jedoch gute Aktivitäten ab pH 1 bis 10,5.

Ist es möglich, Enzymaktivität über einen so breiten pH-Bereich zu haben?

Können Sie uns sagen, welche Pektinase Sie verwenden? Ist außerdem die Aktivität in diesem pH-Bereich gleich oder variiert sie? Können Sie eine Kurve der Aktivität zeigen, die gegen den pH-Wert aufgetragen ist?
Könnten Sie auch weitere Einzelheiten zur Methodik und zu den Kontrollen angeben – Pektin kann nicht-enzymatisch bei niedrigem und hohem pH-Wert hydrolysiert werden.

Antworten (1)

Ich bezweifle tatsächlich, dass die Pektinase einen so breiten pH-Bereich hat, in dem sie optimal wirkt. Bei der Suche im Internet habe ich zwei Zahlen gefunden, die meine Zweifel stützen:

Geben Sie hier die Bildbeschreibung ein

Geben Sie hier die Bildbeschreibung ein

Der erste stammt aus einem Artikel (" Immobilization of pectinase by adsorption on a alginate-coated chitin support "), der die Aktivität von nativer und immobilisierter Pektinase unter verschiedenen Bedingungen vergleicht. Das zweite stammt aus dem Datenblatt einer Firma, die das Enzym verkauft. Beide zeigen eine Aktivität von über 50 % ungefähr zwischen pH 3,5 und 5,5, aber nicht bei höheren oder niedrigeren pH-Werten.

Ich habe das Enzym aus einer 48-stündigen Actinomyceten-Kultur (untergetauchte Fermentation) extrahiert. Die von mir verwendete Methode ist die Miller-DNSA-Methode