Lagerung von Bakterien

Warum werden Bakterienstämme gelagert, wenn sie inaktiv (eingefroren) sind? Was ist das Problem bei der Lagerung von Kulturkulturen über einen längeren Zeitraum?

Wachsende Kulturen brauchen unter anderem menschliche Fürsorge. Gefrorene brauchen nur Strom.

Antworten (2)

Abgesehen von dem Kommentar, dass gefrorene Zellen weniger manuelle Wartung und Kosten erfordern (was ein großes Plus ist), können aktive Kulturen Plasmide neu anordnen/rekombinieren, was zu Mutationen und Deletionen führt (insbesondere im Fall von toxischen Inserts). Siehe zum Beispiel diesen Artikel:

Peijnenburg AA, Bron S, Venema G. 1987. Structural plasmid instability in rekombinations- und reparaturdefizienten Stämmen von Bacillus subtilis . Plasmid 17(2): 167–170.

Und das ist sehr wichtig. Um Experimente vergleichbar und reproduzierbar zu machen, möchten Sie sicher sein, dass Sie denselben Stamm verwenden.

Obwohl sich eine Bakterienkultur auf einer Petrischale, Schräg- oder Stichkultur in einer geschlossenen Umgebung befindet und gesund beginnen kann, wird die Anzahl der lebensfähigen Zellen im Laufe der Zeit auf Null sinken, wenn die Nährstoffe verbraucht werden. Das Ziel der Konservierung der Kulturen in gefrorenem Zustand besteht darin, ihren Metabolismus und damit verbunden ihre Todesrate zu verlangsamen, so dass bei einem erneuten Besuch der Kultur ein Teil der Zellen noch lebensfähig und für die Kultivierung verfügbar ist. Die Gründe für das Absterben der Zellen können zahlreich sein, basieren aber in jedem Fall auf der inhärenten Chemie der Zellen und ihrer Umgebung. Wenn die schädlichen chemischen Reaktionen verlangsamt oder gestoppt werden können, bleibt die gesamte Kultur über einen längeren Zeitraum lebensfähig.

Generell gilt, dass die lebensfähige Lagerdauer von Bakterien mit sinkender Lagertemperatur zunimmt. Sobald die Temperatur jedoch unter dem Gefrierpunkt liegt, sind Kryoschutzmittel unerlässlich, um die durch den Gefrierprozess verursachten Zellschäden zu reduzieren.

Zusätzlich zu den anderen Kommentaren und Antworten sind Kryokonservierungsröhrchen in der Regel viel kleiner und nehmen viel weniger Platz ein als eine Agarplatte oder Stichkulturen.

Hier eine Tabelle, die ungefähre Lagerzeiten bei verschiedenen Bedingungen zeigt:Geben Sie hier die Bildbeschreibung ein

Quellen:
OPS DIAgnostics
Thermo Fisher – Lagerung von Bakterienproben für optimale Lebensfähigkeit