Ich möchte die Expression eines F ab -Fragments in Escherichia coli optimieren . Zur Induktion des lac -Promotors auf dem pAK400-Vektor verwende ich IPTG und Saccharose. Optimiere ich den Ausdruck, falls ich nur IPTG hinzufügen würde?
Sie können das lac-Operon durch zwei Dinge induzieren: Lactose (oder genauer gesagt Allolactose, ein Metabolit davon) und Lactose-Analoga, die nicht von den Bakterien metabolisiert werden.
Lactose induziert die Expression und wird metabolisiert, während IPTG kein Ziel der ist -Galactosidase und wird Ihnen eine starke und dauerhafte Induktion geben. Saccharose hat keine Wirkung auf den Promotor.