Ich habe versucht, die Zusammensetzung von Plasmiden zu verstehen, die beim rekombinanten DNA-Klonen verwendet werden, wie z Ich frage mich, welchen Zweck das Ampicillin-Resistenzgen hat, wenn es in eine Säugetierzelle transfiziert wird (wie es heißt).
Ich verstehe, dass Ampicillin-Resistenz zur Selektion in Bakterienzellen verwendet wird, so dass nur transformierte Bakterien gezüchtet werden und Ampicillin benötigt wird, um eine bakterielle Kontamination in einer Säugetierzellkultur zu verhindern, aber ich verstehe nicht, warum Säugetierzellen ein Resistenzgen benötigen ein Antibiotikum.
Danke
Ich denke, Sie gehen davon aus, dass das Ampicillin-Resistenzgen einen Zweck in den Säugetierzellen retten würde. Es tut nicht.
Wie Sie sagten, wird es nur während des Klonprozesses verwendet, um die Bakterien auszuwählen, die sich replizieren und mehr davon produzieren sollen.
Auf dem von Ihnen geposteten Vektor befindet sich ein Resistenzgen, das Säugetierzellen betrifft: Neomycin. In diesem Fall könnten Sie nach der Transfektion in Säugerzellen nur die Zellen mit dem Plasmid selektieren, indem Sie dem Zellkulturmedium Neomycin zugeben.
Hinweis: Die Auswahl von Neomycin kann einige Zeit dauern (4-5 Tage) und eine höhere Dosis als beispielsweise Puromycin. Hoffe das hilft!
Maximilian Presse