Verwendung von Antibiotika bei der Auswahl guter Plasmide

Ich habe die Rolle des antibiotischen Mediums beim Filtern der Bakterien, die die rekombinanten Plasmide enthalten, von denen mit normalen Plasmiden nicht verstanden. Da alle Plasmide einer bestimmten Bakterienart ein Antibiotikum-Resistenzgen haben, unabhängig davon, ob es rekombinant ist oder nicht, sollte das Antibiotikum keine Wirkung auf die Kolonie haben?

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Antworten (1)

Kurze Antwort: Auswahlprotokolle sollen funktionieren

Bei der Auswahl eines selektierbaren Markers für ein Plasmid wählt man ein Gen, von dem bekannt ist, dass es in dem interessierenden Wirtsorganismus fehlt. Beispielsweise sind Standard-Laborstämme von E. coli frei von extragenomischen Plasmiden und anfällig für das Antibiotikum Ampicillin. Daher werden Plasmide, die Resistenz gegen Ampicillin verleihen, üblicherweise verwendet, um Plasmide in E. coli- Laborstämmen zu erhalten.

Andere erwähnenswerte Dinge:

1. Antibiotikaresistenzgene sind nicht universell.

Das heißt, ein Bakterienstamm, der ein Gen besitzt, das Resistenz gegen ein Antibiotikum verleiht, kann immer noch für viele andere Antibiotika anfällig sein.

2. Nicht alle Plasmide tragen Antibiotikaresistenzgene.

Viele natürlich vorkommende Plasmide werden in freier Wildbahn ausgewählt, weil sie Gene tragen, die es den Bakterien ermöglichen, neue Stoffwechselfunktionen auszuführen, oder Virulenzgene verleihen, die es Bakterien ermöglichen, einen Wirtsorganismus zu infizieren: ( https://en.wikipedia.org/wiki/Plasmid #Eigenschaften_und_Merkmale ). Dies gilt auch für rekombinante Plasmide. Viele häufig verwendete Hefeplasmide werden selektiert, indem der Wirtsstamm in die Lage versetzt wird, einen notwendigen Nährstoff zu produzieren, der im Wachstumsmedium fehlt.