Was betrachte ich in Franklins Foto 51 der DNA?

Hier ist Rosalind Franklins berühmtes Foto 51 , das Röntgenbeugungsbild der DNA, von dem Watson und Crick ihre Struktur abgeleitet haben:

Rosalind Franklins Foto 51

Mein Verständnis ist, dass es ein kurzes DNA-Segment darstellt, das von der Seite gezeigt wird (so dass die Achse, um die sich die Stränge winden, durch die Mitte des Fotos auf und ab verlaufen würde). Wie dieses Doppelhelix-Diagramm aus dem Artikel von Watson und Crick:

Doppelhelix-Diagramm

Ich habe große Probleme, das Foto mit dem Diagramm zu verbinden.

Was sehe ich eigentlich auf dem Foto? Oben und unten sind dunkle Flecken. Eine Rautenform aus dunklen Linien. Ein konzentrischer Kreis (oder eine abgerundete Raute) innerhalb der äußeren Raute. Ein X, das aus zwei sich kreuzenden Reihen von 7 meist horizontalen kurzen Linien oder Klecksen gebildet wird. Welche dieser Merkmale entsprechen welchen Teilen des DNA-Moleküls?

@another'Homosapien' Nur Wikipedia und Google. Es gibt eine Fülle von Informationen über die Struktur der DNA und über die Geschichte des Fotos, aber ich konnte nichts finden, was die auf dem Foto gezeigten Strukturen direkt beschriftet und sie mit dem Diagramm in Beziehung setzt. Verzeihen Sie mir, wenn ich etwas Offensichtliches übersehen habe.
Die Interpretation dieses Bildes ist nicht so einfach, wie Sie denken, aber ich habe weniger als eine Minute gebraucht, um es zu finden .
@another'Homosapien' Dieser Link ist interessant, aber er erklärt nicht, was OP will. Ich glaube, er will das: quora.com/… . Und hier das ausführliche Papier: unamur.be/sciences/physique/udp/documents/…
@another'Homosapien' Das habe ich auch gefunden und gelesen, aber leider verstehe ich es nicht. Es heißt, dass die großen dunklen Flecken oben und unten "die 'Basen' der DNA darstellen", aber dann werden die kleineren "zehn Blobs" als "zehn Basen" bezeichnet, was mich etwas verwirrt hat. Ich hatte auf etwas Konkreteres und Konkreteres gehofft.
Ich habe nur einen Beispiellink gegeben. Ich wollte nur sagen, dass es nicht sehr schwierig ist, solche Papiere zu finden, da @GerardoFurtado ein paar weitere Links gefunden hat ;)
@GerardoFurtado Ja danke, das ist genau das, wonach ich gesucht habe!
@GerardoFurtado Willst du daraus eine echte Antwort machen? Wäre großartig...
@Chris Naja, um ehrlich zu sein, kommt mir das wie Betrug vor, da ich das Paper ja schon verlinkt habe! Aber der Link ist hier, wenn jemand eine gute Erklärung darauf aufbauen möchte, kann er das gerne tun.
@GerardoFurtado Warum? Sie haben das relevante Papier ausgegraben, also denke ich, dass Sie die Anerkennung dafür verdienen.
@Chris OK, ich werde es versuchen.
Ihre Eröffnungsaussage ist falsch - "Hier ist Rosalind Franklins berühmtes Foto 51, das Röntgenbeugungsbild der DNA, aus dem Watson und Crick ihre Struktur abgeleitet haben" - Watson und Crick haben die Struktur nicht allein aus dem Bild abgeleitet. Sie konnten dies tun, weil sie bereits über eine Vielzahl von Informationen über die Struktur verfügten und seit einiger Zeit an dem Problem gearbeitet hatten. Hätte man sich nur das Bild angesehen, hätte Franklin – der in dieser Art von Kristallographie weitaus geschickter war – die Struktur zweifellos schnell identifiziert.
Wie Gerardo dachte ich, dies sei auf der langen Achse - ich habe mich dank dieser Frage auch noch einmal in die Ausgabe eingelesen und entdeckt, dass das Foto tatsächlich von Ray Gosling war, nicht von Rosalind Franklin. Ich kann nicht einmal bestätigen, ob sie (formal) seine Vorgesetzte war; Aus einer anderen Quelle (mit besseren Referenzen als Wikipedia) geht hervor, dass sie aufgrund ihrer damaligen Position nicht offiziell berechtigt war, Studenten zu betreuen. Ich werde wahrscheinlich später eine richtige Frage dazu zusammenstellen, wenn ich Zeit habe.
Separate Frage jetzt gepostet: biology.stackexchange.com/questions/59015/…

Antworten (1)

Nun, du hast gesagt, dass du...

... haben große Probleme, das Foto mit dem Diagramm zu verbinden.

Und das ist durchaus entschuldbar: Die Interpretation dieses Röntgenbildes ist tatsächlich sehr kompliziert .

Alle Zitate und Bilder in dieser Antwort, mit Ausnahme der Liste mit Aufzählungszeichen weiter unten, stammen aus diesem Papier (Lucas, 2008), das dieses historische Bild im Detail erklärt.

Vollständige Offenlegung: Ich dachte immer, dass dieses Bild den Röntgenstrahl darstellt, der in Längsrichtung (dh entlang der Hauptachse) durch die DNA geht. Allerdings geht es quer:

Wenn fadenförmige Makromoleküle entlang einer festgelegten Richtung in eine Faser gepackt werden, fallen die von der Faser gebeugten Röntgenintensitäten entlang ungefähr gerader und äquidistanter Linien, den sogenannten Schichtlinien, senkrecht zu dieser Richtung auf den Beobachtungsschirm. Dieses wichtige Konzept wurde 1921 von Michael Polanyi für die Röntgenuntersuchung von Zellulose eingeführt. (Hervorhebung von mir)

Dies sind die sogenannten Schichtlinien (ich behalte die Legende des Originalpapiers in allen Bildern):

Abb.2 Prinzip des geometrischen Aufbaus der hyperbolischen Schichtlinien im Röntgenbeugungsmuster einer linearen Anordnung von Punktstreuern (dunkle Kreise) mit Periode P. ES: Ewald Sphere;  LP: Schichtebenen;  LL: Schichtlinien.  Die schattierten Bereiche sind Kegel, deren Schnittpunkte durch das Sieb die Schichtlinien erzeugen.

Dann begannen Crick und andere laut dem Artikel immer noch mit der Hypothese, wie die Röntgenbeugung in einer monoatomaren Helix aussehen würde:

1952 entwickelten Cochran, Crick und Vand eine analytische Theorie für die Röntgenbeugung durch eine monoatomare Helix. Das unmittelbare Interesse ihrer Theorie bestand darin, einen transparenten, analytischen Ausdruck dieser Amplituden zu geben, zu einer Zeit im Jahr 1952, als Computer, falls überhaupt vorhanden, kaum zu einer Brute-Force-Berechnung der gesamten Beugungsintensität in der Lage waren.

Dies ist das Röntgenbeugungsmuster in einer einatomigen Helix, was sehr wichtig ist, um später das berühmte DNA-Beugungsbild zu verstehen:

Abb.3 Computersimuliertes Röntgenbeugungsmuster einer Phosphorwendel mit Periode P, Radius r und Atomwiederholung p_a.  Beachten Sie das zentrale Andreaskreuz, die Bessel-Oszillationen entlang der Schichtlinien und das Rautenmuster (hervorgehoben durch unterbrochene Linien) mit fast leeren Nord- und Südrauten.  Die Strukturparameter der Helix (P, r, p_a) sind aus den geometrischen Parametern des Musters (2pi/P, alpha, 2pi/p_a) ablesbar.

Mit diesem theoretischen Hintergrund können wir also unser berühmtes Bild verstehen:

Abb. 4 Die historischen Röntgenfaserbeugungsmuster (a) von A-DNA und (b) B-DNA, aufgetragen im gleichen Maßstab.  Die Linie der 8. Schicht des Musters (a) tritt etwa bei der Linie der 10. Schicht des Musters (b) auf, was eine 20%ige Zunahme der DNS-Helixperiode widerspiegelt.  Das A-DNA-Muster zeigt kristalline Flecken auf den ersten Schichtlinien.

In diesem Bild zeigt ein Röntgenbeugungsbild von A-DNA (links) und der häufigeren B-DNA (rechts) ein periodisches Muster in den Schichtlinien.

Die Beugungsmuster können wie folgt interpretiert werden ( Quelle ):

  • Die Schichtlinientrennung offenbart den Wert der Polymerwiederholungsperiode. Die Abnahme des Schichtlinienabstands um über 20 % beim Übergang von A nach B impliziert eine Zunahme um diesen Betrag in der Periode: P = 2,8 nm für A-DNA und 3,4 nm für B-DNA.
  • Sehen Sie sich die scharfen, diskreten Flecken an, die in der Nähe der Mitte des Beugungsmusters für A-DNA entlang der ersten Schichtlinien beobachtet werden. Diese deuten auf die kristalline Ordnung in der Faser hin. Im B-DNA-Muster mit hoher Luftfeuchtigkeit fehlen diese kristallinen Flecken, was darauf hindeutet, dass die zusätzlichen Wassermoleküle in den Raum zwischen den DNA-Molekülen eingedrungen sein müssen und sie aus dem Einschluss in Kristalliten befreit haben.
  • Die dicken Bögen an der Ober- und Unterseite des B-DNA-Musters befinden sich in Abständen von ungefähr 10 Schichtlinien von der Mitte, was bedeutet, dass B-DNA 10 Wiederholungseinheiten innerhalb einer Periode von 3,4 nm hatte. Diese werden durch die Streuung von Röntgenstrahlen an den äquidistanten, nahezu horizontalen flachen Basen im Abstand von 0,34 nm erzeugt. Dem A-DNA-Muster fehlen diese großen Verschmierungen, was darauf hindeutet, dass die Basen in A-DNA nicht horizontal sind und die Anzahl der Basenpaare pro Helixperiode näher bei 11 liegt.
  • Das zentrale Kreuz in der B-DNA repräsentiert das Saint-Andreas-Kreuz, das von einem helikalen Molekül erwartet wird. Der große Radius r (1 nm, angezeigt durch den Meridianwinkel des Kreuzes) und das Fehlen von Intensität in den Meridianrauten zeigt an, dass sich das Phosphatrückgrat an der Peripherie der Helix befindet. Dieses Kreuz scheint in A-DNA zu fehlen, dies ist jedoch auf destruktive Interferenz von einigen der geneigten Basenpaare zurückzuführen.

Schließlich ist dies ein Bild, das die Doppelstrangstruktur der DNA (sowohl A- als auch B-DNAs) besser mit dem Röntgenbeugungsbild in Beziehung setzt:

P11.  Optische Simulation der Röntgenbeugung durch eine A-DNA-Faser.  Das linke Motiv ist auf einem 2-D-Gitter in Tafel P11 der Folie angeordnet.  Die starken Merkmale auf den Linien der 6. bis 8. Schicht sowohl des Röntgenbildes als auch des simulierten Musters ergeben sich aus den geneigten Basenpaaren, die von der Kante gesehen werden und ein zickzackförmiges Doppelschlitzgitter bilden.  P12.  Optische Simulation der Röntgenbeugung durch eine B-DNA-Faser.  Die starken Streifen auf den Linien der 10. Schicht sowohl des Röntgenbildes als auch des simulierten Musters stammen von den horizontalen Basenpaaren, die von der Kante gesehen werden.

Bezug:

Lukas, A. (2008). A-DNA und B-DNA: Vergleich ihrer historischen Röntgenfaserbeugungsbilder. Journal of Chemical Education, 85(5), S.737.

IIRC, in The Double Helix (eine umstrittene Quelle, um sicher zu sein), behauptete Watson, dass die Hauptwirkung des Bildes darin bestand, dass es die Messung eines bestimmten Winkels ermöglichte, was es ihnen ermöglichte, ihre Idee einer Doppelhelix in eine tatsächliche atomare umzuwandeln Struktur (da der Winkel nur durch die Bindungswinkel dieser bestimmten molekularen Anordnung ermöglicht wurde). Rosalind Franklins Bild wurde in derselben Zeitschrift wie Crick und Watson veröffentlicht, obwohl sie (und die Herausgeber) zu der Zeit glaubten, es sei eine unabhängige Bestätigung ihrer Struktur und nicht ein entscheidender Teil bei ihrer Bestimmung.
Tolle Antwort. Vielen Dank für diese ausführliche und verständliche Erklärung.