Wie leiten Biologen den korrekten ORF einer DNA-Sequenz ab?

Jede DNA (RNA)-Sequenz hat 6 mögliche offene Leserahmen (ORF). Meine Frage ist: Was sind die theoretischen Grundlagen von In-vitro- oder In-Silico- Versuchen, den richtigen Leserahmen einer Sequenz zu finden?

Ist es nur der Abstand zwischen Start- und Stop-Codons oder gibt es andere Faktoren mit wichtigeren Auswirkungen auf dieses Thema?

Ich habe deine Frage etwas bearbeitet. Bitte zögern Sie nicht, einen Rollback durchzuführen, wenn dies nicht zu Ihnen passt
Homologie, ESTs, Codon-Nutzung, Länge des ORF
Die Start- und Stoppcodons hängen vom ausgewählten ORF ab. Wenn einer der sechs ORFs gut gepaarte Start- und Stoppcodons hat und die anderen fünf nicht, dann ist das ein ziemlich guter Hinweis. Es gibt andere Möglichkeiten, dies zu sagen (Shine-Dalgarno-Sequenzen in Prokaryoten, Kozak-Konsensussequenzen in Eukaryoten usw.).
Kanadier, erkläre bitte mehr

Antworten (1)

TransDecoder ist ein häufig verwendetes Programm zum Extrahieren wahrscheinlich codierender Regionen aus Transkriptom-Assemblierungen, das Folgendes tut, um einen Anruf zu tätigen:

TransDecoder identifiziert wahrscheinliche Codierungssequenzen basierend auf den folgenden Kriterien:

  • ein offener Leserahmen (ORF) von minimaler Länge wird in einer Transkriptsequenz gefunden
  • ein Log-Likelihood-Score, ähnlich dem, der von der GeneID-Software berechnet wird, ist > 0.
  • die obige Kodierungsbewertung ist am größten, wenn der ORF im 1. Leserahmen bewertet wird, verglichen mit den Bewertungen in den anderen 5 Leserahmen.
  • wenn ein Kandidaten-ORF gefunden wird, der vollständig von den Koordinaten eines anderen Kandidaten-ORF eingekapselt ist, wird der längere gemeldet. Ein einzelnes Transkript kann jedoch mehrere ORFs melden (unter Berücksichtigung von Operons, Chimären usw.).
  • Optional weist das mutmaßliche Peptid eine Übereinstimmung mit einer Pfam-Domäne über dem Rausch-Grenzwert auf.

Suchen Sie also im Wesentlichen nach dem längsten ORF und verwenden Sie dann eine sekundäre Metrik (Hidden-Markov-Modell, Positionsgewichtungs-Array, Datenbankabfrage usw.), um Ihre Vorhersage zu verfeinern.