Was ist der Unterschied zwischen Transformation und Transfektion?

Was ist der Unterschied zwischen Transformation und Transfektion? Wie funktionieren diese beiden Methoden?

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Wenn Sie sich für die Geschichte der Molekularbiologie interessieren, ist dies eine interessante Frage.

Grundsätzlich wurde Transformation verwendet, um Experimente zu beschreiben, bei denen der Phänotyp eines Organismus durch die Aufnahme von DNA verändert wurde, und aufgrund der Art und Weise, wie sich dies in bakteriellen Systemen entwickelte, war diese DNA normalerweise ein Plasmid. Dann wurde es möglich, mit gereinigter Phagen-DNA Zellen zu infizieren, woraufhin die „transformierten“ Zellen Phagenpartikel produzierten – aus naheliegenden Gründen wurde dies als Transfektion bezeichnet.

Als sich die Bemühungen darauf konzentrierten, die gleichen Techniken mit kultivierten tierischen Zellen zum Laufen zu bringen, basierten viele der Vektoren auf viralen Genomen (z. B. SV40), und diese Forscher bezeichneten dies als Transfektion. An diesem Punkt wurde die Unterscheidung zwischen den beiden Begriffen bedeutungslos, und die Verwendung hat eher historische Gründe. Interessanterweise wird bei molekularen Manipulationen von Hefe, wo es keine Viren gibt, das Wort Transfektion selten verwendet.

Um die derzeitige Verwendung der Wörter zu ergänzen, durchlaufen Bakterien eine Transformation, während das Einführen von Plasmiden in Zelllinien als Transfektion bezeichnet wird (oft fälschlicherweise, da die meisten Menschen kein lebendes Virus zur Infektion verwenden, sondern stattdessen kationische Lipide verwenden).
@ leonardo, aber ich habe viele Wissenschaftler getroffen, die mit tierischen Zellen arbeiten und das Einbringen von Plasmiden in Bakterien als Transfektion bezeichnen
Alan, es beweist nur, wie durcheinander die beiden Begriffe geworden sind. Der richtige Begriff in diesem Fall ist Transformation – nackte Aufnahme von DNA, genau wie es für Liposomen-vermittelte „Transfektion“ wäre.
@leonardo: Nun, bei tierischen Zellen wird die Elektroporation auch als Transfektion (oder neue Wörter wie Nukleofektion) bezeichnet. Wir verwenden routinemäßig den Begriff Transfektion für tierische Zellen, behalten aber die Verwendung von Transformation für Bakterien bei. Die Verwendung ist, wie Alan sagte, rein historisch bedingt

Soweit ich weiß (und ich habe keine Beweise dagegen gefunden), ist dies hauptsächlich ein semantischer Unterschied. Beide Prozesse beschreiben die Zugabe von genetischem Material in Zellen unter Verwendung verschiedener Techniken.

Die Transformation wird hier hauptsächlich für bakterielle Arbeiten verwendet (z. B. die Transformation von Plasmiden), während die Transfektion fast ausschließlich für eukaryotische Zellen verwendet wird. Der Grund dafür könnte sein, dass der Begriff Transformation auch in eukaryotischen Zellen verwendet wird, um die Entwicklung von Zellen zu Krebszellen zu beschreiben.

Die Techniken sind nicht sehr unterschiedlich und es gibt viele von ihnen. Transfektionen verwenden häufig Transfektionsmittel, die Poren in der Zellmembran bilden, durch die die DNA in die Zelle eindringen kann. Dies kann auch mit einem kurzen Elektropuls erfolgen. Viele Transformationen werden mit "chemisch behandelten" Zellen durchgeführt, wobei die Zellen in einen Zustand gebracht werden, in dem sie DNA aufnehmen, die an ihrer Außenseite haftet.

Die Wikipedia-Artikel zu Transfektion und Transformation geben Ihnen weitere Einzelheiten zu den Methoden.

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