Wenn wir nur 1 Primer in PCR hinzufügen [geschlossen]

Was würde passieren, wenn wir nur einen Primer, sagen wir Forward-Primer, zur PCR hinzufügen?PCR-Amplifikation

(Bildnachweis: Wikipedia) Wie aus dem Bild hervorgeht, benötigen wir sowohl Vorwärts- als auch Rückwärts-Primer, damit es funktioniert (es sei denn, wir haben eine Sequenz, bei der ein einzelner Primer sowohl vorwärts als auch rückwärts arbeiten kann). Ich habe hier online gelesen , dass die Einbeziehung eines einzelnen Primers zu einer linearen Amplifikation führt, aber ich denke, es sollte überhaupt keine Amplifikation geben. Können Sie mir helfen, meine Zweifel auszuräumen?

Willkommen beim Biology Stack Exchange. Sie müssen jedoch etwas mehr recherchieren, bevor Sie Fragen wie diese stellen. Vermutungen reichen nicht aus. Es gibt viele Ressourcen im Internet, die PCR beschreiben, und wenn Sie sie sorgfältig lesen – insbesondere die Diagramme – wird es offensichtlich sein, warum zwei Primer benötigt werden. Das ist grundlegend. Sehen Sie sich zum Beispiel das Diagramm hier an.
Hallo David! Ich habe online recherchiert, bevor ich die Frage gestellt habe, und mir auch den von Ihnen gesendeten Link angesehen. Ich entschuldige mich, da ich es nicht deutlich gemacht habe. Ich werde die Frage bearbeiten, um sie zu verdeutlichen.
Die PCR mit einem einzigen Primer ähnelt der DNA-Sequenzierung, außer dass Sie keine markierten terminalen Monomere haben, um die Reaktion zu stoppen.
Ich bin mir nicht sicher, warum es als Off-Topic auf Eis gelegt wurde. Es ist keine Frage, für die ich Noten bekomme. Ich bin kein Student mehr. Ich studiere Biologie aus Interesse. Ich habe mich gefragt, was passieren würde, wenn es nur einen Primer gibt, und ich denke, theoretisch sollte es keine Verstärkung geben. Ich finde im Internet widersprüchliche Ansichten und wollte nur wissen, ob ich etwas übersehe.

Antworten (2)

Ich denke, dass Folgendes passieren sollte: PCR-Amplifikation mit einem PrimerEs würde keine Amplifikation geben, aber wir würden nach n Zyklen n Kopien von einzelsträngiger DNA erhalten und die einzige doppelsträngige DNA, die mit einem neuen komplementären Strang begonnen hat.

Die Verwendung von 1 Primer führt zu einer linearen Amplifikation der Originalsequenz in jedem Zyklus: Der Primer leitet einen einzelnen Lauf der Polymerase. Im Gegensatz zur "Kettenreaktion" in der PCR, die exponentiell ist. Daher erhalten Sie mit einem Primer eine lineare Amplifikation von beispielsweise dem 40-fachen der ursprünglichen Anzahl von Molekülen, mit denen Sie begonnen haben, während Sie mit zwei Primern eine exponentielle (~2 40 ) Amplifikation erhalten . Sie haben Recht, dass mit einer Grundierung die Verstärkung vernachlässigbar, fast unsichtbar ist.

Ich glaube nicht, dass es überhaupt keine Verstärkung geben würde. Was nach 40 Zyklen vorhanden sein wird, sind 40 einzelsträngige DNAs und nur eine interessierende DNA. Können Sie erklären, wie es 40 weitere Moleküle geben würde?