Was sind die Gateway-Clonase-Enzyme?

Das Gateway-Klonsystem verwendet das, was Life Technologies als "Clonase-Enzymmischung" bezeichnet, um die BP- und LR-Reaktionen zu katalysieren.

Was ist in dieser Enzymmischung? Gibt es eine Reihenfolge für sie?

Ich würde mir vorstellen, dass Sie nicht herausfinden können, was sie sind, wenn sie nicht im Datenblatt aufgeführt sind ...
@MattDMo Das Handbuch (Veröffentlichungsnummer MAN0000282) erwähnt, dass es sich um "Int, Xis, IHF" handelt. Sind das echte Gene? Ich würde erwarten, dass sie weiterentwickelt werden, aber funktionieren die nativen Gene überhaupt nicht?
@Superbest sie sind Rekombinasen. Normalerweise werden die im Labor verwendeten Enzyme für eine bessere Stabilität und Wirksamkeit bis zu einem gewissen Grad verändert.

Antworten (1)

Die Prototypen für diese Proteine ​​sind:

die Bakteriophagen-λ-Proteine ​​Int und Xis, die für die Integration bzw. Exzision von Prophagen erforderlich sind. Sie sind, wie von @WYSIWYG erwähnt, Rekombinasen.

Geben Sie hier die Bildbeschreibung ein

Genetische Karte des Bakteriophagen λ ( Bildquelle )

der ursprüngliche Ihf (Integration/Integration Host Factor) wurde als E. coli -Protein identifiziert, das für die Prophagen-Integration erforderlich ist.

Wie Sie vielleicht erwarten, kommen Int- und Xis-Proteine ​​in vielen Phagengenomen und in integrierten Prophagen in Bakteriengenomen vor, und Ihf ist allgegenwärtig, weil es an der bakteriellen DNA-Replikation beteiligt ist. Ich kann mir vorstellen, dass die tatsächliche Quelle der von Life Technologies verwendeten Proteine ​​ein Betriebsgeheimnis sein könnte.

Was sind die Gateway-Clonase-Enzyme?
AntwortenHierDatenschutz-Bestimmungen1y, 0v